>

English
Дейности

начало » Дейности


НАУЧНОИЗСЛЕДОВАТЕЛСКА ДЕЙНОСТ
Основните научни направления в отдела по вирусология са следните:

По проблема грип основното научно-приложно направление е приложението на съвременни методи за разшифроване етиологията на грипните епидемии у нас. В последните години в лабораторията по "Грип и ОРЗ" наред с класическите методи на диагностика е внедрен и молекулярно-биологичният метод RT-PCR за типова характеристика на генома на грипните вируси, както и за субтипиране на хемаглутинина и невраминидазата на грипните вируси от тип А.

Ефективно се използват съвременни модификации на бързите имуноензимни и имунофлуоресцентния методи. Прилагат се някои методи за генетичен анализ на грипните вируси. Изработена е ефективна схема за изследванията на грипа, включваща комплекс от класически и съвременни методи и приложима както по време на сезонните грипни епидемии, така и при евентуална поява на нов пандемичен грипен вирус. През 2006 г. е защитена докторска дисертация по проблемДруго научно направление в лабораторията е определяне ролята на инфекция, причинена от респираторно-синцитиалния вирус при деца. Във връзка с това се провеждат диагностични проучвания при деца до 2 годишна възраст с тежка респираторна симптоматика.

Колективът на лабораторията от години извършва и научни проучвания, свързани с имунизационната практика на грипа у нас. Установяването на по-висока имуногенност на грипните ваксини в комбинация с имуностимулиращи препарати има значение за профилактичната практика при грипа.

Основните насоки в дейността на лаборатория "Хепатитни вируси" са проучвания свързани с етиологията, разпространението и профилактиката на хепатотропните вируси HAV,HBV,HDV,HCV,HEV в страната. Като продължение и развитие на направлението, разгърнато от създаване на лабораторията, свързано с проучването на новооткритите хепатотропни вируси, бяха получени първите данни за страната относно наличието на хепатит Е вирусна инфекция, която се представя в единични клинично проявени случаи и подобно на данни от други европейски страни, не представлява сериозна заплаха за страната.

< начало

Проучват се различни аспекти от хепатит С вирусната инфекция със специално внимание към острата и форма, както и генотипната характеристика на хепатитния C вирус, сред различни групи пациенти с хронична форма на инфекция. Тези проучвания са от съществено значение за науката и практиката с оглед вземане правилни управленчески решения за контрол и превенция на това социално значимо заболяване.

От съществено научно-практическо значение е направлението, свързано с проверка на имунологичната ефективност на прилаганите ваксини за профилактика на хепатит В вирусната инфекция в страната. В тази насока бяха извършени съвместни изследвания с други медицински специалисти в рамките на национални проучвания, а също така проучвания като част от международен проект Interreg, финансиран от Европейския съюз, включващ проучване разпространението и профилактиката с оценка на имунологичния отговор при хепатит В вирусната инфекция, както и разпространението на хепатит В и С вирусните инфекции сред общата популация в страната.

Националната референтна лаборатория по "Ентеровируси" извършва вирусологични и серологични изследвания с цел проследяване циркулацията на ентеровирусите в България и установяване на тяхната етиологична роля при някои сериозни заболявания на ЦНС, сърцето и др. Осъществява се вирусологичен надзор над случаите на остри вяли парализи при децата на възраст до 15г. с цел да не се пропусне поява и циркулация на вирулентни полиовируси. След епидемичния взрив от полиомиелит през 2001г. у нас случаи на полиомиелит не са регистрирани и вирулентни полиовируси не са изолирани. Проучва се участието на ентеровирусите в развитието на серозни менингити и менингоенцефалити. При изследваните пациенти с невроинфекции се доказват предимно различни серотипове ЕСНО и Коксаки В вируси. Етиологичната роля на Коксаки В вирусите се установява серологично при случаи на остри миокардити, перикардити и дилатативна кардиомиопатия. Лабораторията извършва проучване върху участието на ротавирусите в етиологията на остри гастроентерити. Доказва се значително разпространение на ротавирусната инфекция у нас със засягане на около 50% от изследваните деца на възраст до 5 години с диариен синдром.

В Потвърдителна лаборатория "HIV" основните научни направления са свързани с проучвания на антиретровирусната резистентност на HIV-1 сред български пациенти на антиретровирусна терапия. Извършват се проучвания върху разпространението на HIV-1 субтиповете и на T–лимфотропните ретровируси НТLV–I и II сред уязвими групи от българското население. Провеждат се серологични и молекулярно-биологични изследвания за вирусологичен контрол на НІV-1 инфекция при бременни, майки и техните новородени деца. Получените данни имат научно-практично значение по отношение правилния подбор на антиретровирусната терапия и определяне циркулиращите в страната генотипове и субтипове.
< начало

Научната дейност на лабораторията по "Клетъчни култури" се базира на дългогодишното сътрудничество и съвместните научни проекти и публикации между лабораториите "Клетъчни култури" и "Ретровируси", както и с някои други лаборатории от отдела и други институции в страната. Колективът на тази лаборатория е един от водещите в проучване цитотоксичния ефект на различни метални комплекси, природни продукти и други вещества върху туморни и нетуморни клетъчни линии. Специалистите от лабораторията имат и дългогодишен опит в изучаване на ефекта на новосинтезирани и химически охарактеризирани съединения върху различни вирусни модели – HSV 1 , HSV, НІV-1, грип, аденовируси, RSV и др., както и в изясняване на някои от механизмите, чрез които конкретното вещество селективно инхибира вирусната репликация. В научната си работа колективът използва различни класически и съвременни молекулярно-биологични методики, а именно: определяне на цитотоксичност; морфологични тестове за апоптоза/некроза – оцветяване на ДНК и РНК с акридин оранж, багрене на митохондрии с Янусово зелено; определяне на митотичен индекс – оцветяване с хематоксилин-еозин; eфект върху вирусната репликация – Reed-Mench тест; агарозна и полиакриламидна електрофореза; имуноблот анализ.

В Лабораторията по "Молекулярна вирусология" се извършва диагностика и анализ на онкогенни вируси, сред които човешките папиломни и полиомни вируси (human papillomavirus - HPV; human polyomavirus - JCV, BKV). През последните години успешно бяха въведени най-съвременните методи за детекция, типизация и анализ на HPV: различни варианти на полимеразната верижна реакция – PCR (конвенционален, мултиплексен, nested-PCR, real-time PCR), Single-strand conformation polymorphism analisis (SSCP) и др. Завърши първата част на изследователския проект „Молекулярно-вирусологични проучвания на доброкачествени, предракови и ракови изменения, причинени от човешки папиломни вируси", който продължава с изследвания върху разпространението и генотипната характеристика на HPV в България.

Научната дейност на лабораторията по "Морбили, паротит и рубеола" е насочена в следните направления: проследяване на заболяемостта от морбили, епидемичен паротит и рубеола; контрол върху специфичната профилактика на морбили, епидемичен паротит и рубеола; изясняване на някои клинични прояви при морбили – участие на морбилния вирус в етиологията на подострия склерозиращ паненцефалит и мултиплената склероза; роля на рубеолния вирус в патологията на вродените малформации; проучвания върху разпространението на парвовирус В19 и неговата роля при деца с конгенитални увреждания; подобряване качествата на произвежданите в лабораторията диагностични препарати.

< начало

Лабораторията "Ретровируси" е заета изключително с научно-изследователска и образователна дейност. Научната дейност на лабораторията е насочена в следните направления: изследване ролята на някои от човешките фактори за заразяването, хода и прогресията на НІV-инфекцията у български индивиди, живеещи с НІV; изучаване динамиката на синтеза на сиалогликопротеините на НІV-1 в условия на остра и хронична инфекция в клетъчна култура и характеристика на пречистените сиалогликопротеинни епитопи; изучаване ефекта на потенциални анти-НІV вещества в човешки клетъчни линии, като предмет на изучаване са новосинтезирани 4-хидроксикумарини, както и техни комплексни съединения с лантаниди с дизайн за анти-НІV интегразна активност, търсене на други мишени на действие – обратна транскриптаза и протеаза и използване на тестове за инфекциозност, както и съвременни молекулярно-биологични методи. В научната си дейност лабораторията е в тясна колаборация със специалисти от лабораторията по "Клетъчни култури".

Проучванията в областта на разпространението на херпесните вируси се извършват в лабораторията по "Херпесни вируси". Анализът на циркулацията на тези вируси /HSV, VZV, CMV, EBV/ се базира на широката диагностична дейност на лабораторията. Предстои въвеждане на молекулярно-биологичните методи в практиката на лабораторията.

Проучванията в областта на разпространението на ендемичните за България рикетсиози Q треска и Марсилска треска в лаборатория "Рикетсии и хламидии" са съвместни с лабораторията към ВМА. Тези проучвания имат научно-практично значение при профилактиката и ограничаване разпространението на кърлежовопреносимите трески в България.

< начало

Научно-изследователската дейност на отдела по имунология и алергология е многопосочна:

Хомеостаза и регенерация на имунната система.

Нарушенията на Т-клетъчния имунен отговор в хода на хронични инфекции и възможностите за възстановяването му се проучват в ЦЛИ и лаборатория Медиатори на клетъчното възпаление при пациенти с НІV-1 и/или микобактериална инфекция.

Характеризирани са основните прояви на дисбаланс и дефицит на нивото на "малките" CD8 и CD4 Т лимфоцитни субпопулации, ролята на Тh1/Th2 цитокиновия баланс в патогенезата на СПИН, както и закономерностите на възстановяване на Т-клетъчните субпопулации и техните функции в хода на специфичната антиретровирусна и противотуберкулозна терапия. Търсенето на фенотипни прояви на нарушена Т-клетъчна функция се разширява с проучването на други социално-значими инфекции: HBV, CMV, ЕBV-свързан хепатит.

При тези изследвания ЦЛИ осъществява сътрудничество с френски научен колектив (INSERM-U448 към Медицинския факултет Париж XII), а лаборатория "Медиатори на клетъчното възпаление" - с италиански научни колективи от Университетска болница – гр. Бреша; Институт по инфекциозни болести и тропическа медицина и Катедра Имунология на Университета в гр. Милано, Университет "Тор Вергата" Рим.

Клетъчни механизми на вродения имунен отговор, методи за оценка и възможности за имуномодулация. Орални полибактериални имуностимулатори - механизъм на действие и имунологична ефективност.

Регенерация на имунната система след автоложни и алогенни трансплантации: в ЦЛИ, в сътрудничество със СБАЛДОХЗ и НЦХТ се проучват закономерностите на възстановяване на лимфоцитните популации и техните функции след трансплантация на стволови клетки от перфирна кръв/костен мозък.

Ново направление в ЦЛИ, целящо дефинирането на параметри за характеризиране на клетъчните ефекторни механизми на естествения имунитет, както и възможностите за тяхната модулация; за пръв път ще бъдат изследвани малки регулаторни левкоцитни субпопулации, които имат отношение към активирането на естествения клетъчен имунитет и насочването на адаптивния отговор. Разработването на полибактериалните имуномодулатори се налага във връзка с необходимостта за откриване на нови пътища за профилактика и лечение на неспецифични инфекции във връзка с глобалния проблем с антибиотичната резистентност и препоръчаната от СЗО разработка на лигавични ваксини.

Първият български полибактериален имуномодулатор "Респивакс" (Б. Петрунов и сътр.) е създаден още през втората половина на 80-те години и от тогава успешно се прилага в медицинската практика за имунопрофилактика и терапия на неспецифични респираторни заболявания. С този препарат се поставя началото на нова категория имуномодулатори, съдържащи едновременно бактериални лизати и убити цели бактериални клетки: Уростим - за профилактика и терапия на урогенитални инфекции, Дентавакс – за профилактика и терапия на възпаления на устната лигавица и пародонта, Фариностим – за профилактика и терапия на възпалителни заболявания на устната кухина и гърлото. На първия етап от изследванията върху експериментални модели се доказа безвердеността и протективната активност на полибактериалните имуномодулатори по отношение на възпалителни моделни инфекции. Получените експериментални данни дадоха основание на авторите да преминат към втория етап – имунологични изследвания при доброволци и третия етап – имунологични изследвания на пациенти с възпалителни заболявания на урогениталния тракт и устната лигавица и пародонта. В това направление работи голям екип, обединяващ представители на всички лаборатории от отдела и БулБио АД.

Разработване на методи за изследване на лигавичния имунитет.

В лаборатория "Хуморален и лигавичен имунитет", където за първи път у нас са разработени количествени методи за оценка на лигавичния имунитет, изведени са количествени показатели за лигавичния имунитет на българската популация в норма и патология, и са изработени нормални стойности. В колаборация с д-р Пенка Колева ("Имунотест"), е въведен имунодифузионен метод за определяне количеството на общите слюнчени S-IgA и IgG. Разработен е и ELISA метод за определяне на специфични слюнчени антитела от S-IgA, IgG и IgM изотип, с набор от различни бактериални видове (C. albicans, L. acidophilus, S. aureus, S. pyogenes, K. pneumoniae, P. mirabilis, E. coli и др.), най- чести причинители на заболявания на устната кухина, респираторния и урогениталния тракт. Разработените методи се прилагат успешно за проучване на лигавичния имунитет под влияние на различни външни фактори: имуномодулация с орални полибактериални препарати и в условията на замърсяване с различни индустриални вредности.

< начало

Изучаване на алергизиращите фактори и механизма на тяхното действие.

Лаборатория по алергия поставя началото на задълбочено проучване на алергизиращите фактори от биологичен произход – поленови зърна и плесенни спори. Това са едни от първите аеробиологични проучвания в Европа, позволили издаването на специален информационен бюлетин за сезонното и количественото разпространение на поленовите алергени в страната и подготвянето на поленов календар. Получени са оригинални данни във връзка с механизма на действие на алергена от домашен прах и съдържащите се в него микрокърлежи от рода Pteronyssinus, в сравнение с поленовите. Въз основа на тях е разработен оригинален тест за оценка на специфичната активност на атопичните алергени и предразположението или наличието на атопия в даден индивид.

Лабораторията въвежда за пръв път в областта на профпатологията специфичните алергологични и имунологични изследвания, обективизиращи материалния субстрат на алергичната реакция. Нови направления на научно-изследователската дейност са изучаване влиянието на въздушното замърсяване върху имунната система и алергизацията на организма, както и характеризирането на т.н. "Indoor" алергени: биологичните алергизиращи фактори във въздуха и праха на домовете ни. с изучаването на алергизиращите и имунологични свойства на алергенни екстракти произведени от суровини събрани от различни климато-географски райони в света, които показаха голямото значение на местните природни условия за определяне на алергизиращата активност на даден биологичен продукт /с участието на Русия, Германия, Полша, Чехия /и с участие в първото голямо международно проучване върху генетичните фактори определящи появата и развитието на алергичните реакции /с участието на САЩ, Япония, Италия, Франция, Гърция, Дания, Германия, Австралия/.

Подходи за доказване и повлияване на алергичните реакции.

Лаборатория по Алергия е един от световните пионери в проучването на химически модифицираните алергени, т. нар. алергоиди - едни от най-перспективните препарати за специична имунотерапия. Първият български алергоид от групов поленов алерген близо 15 години се използва в клиничната алергологична практика в страната ни. Успешно продължение в това направление е получаването и характеризирането на алергоид от микрокърлежите в домашния прах, който вече се използва за лечение на сенсибилизирани към тях алергично болни. Най-значимият проект, изпълнен от лаборатория по Алергия е внедряването въз основа на световния опит и разработени собствени технологии производство на алергенни препарати за специфична диагностика и лечение-имунотерапия на алергичните заболявания.

Разработена е и съвременна система за оценка на качествата и стандартизация на алергените. Осъществява се активно международно сътрудничество във връзка с разработването на първите международни референтни препарати в областта на алерологията (с участието на САЩ,Франция, Англия, Дания, Швеция, Холандия). Съвместно с ЦЛИ са сравнени и разработени за рутинно приложение няколко метода от ново поколение, позволяващи in vitro оценка на индивидуалната алергична реактивност посредством флоуцитометрия. Активно се изучават в последните години въпросите свързани с in door замърсителите/алергените във въздуха и тяхното значение за алергизацията на човешкия организъм.

< начало

Инфекциозна имуноморфология.

Лабораторията по имуноморфология и електронна микроскопия извършва светлинномикроскопски и електронномикроскопски проучвания върху експериментални модели в няколко насоки: промени в хода на инфекции, промени, предизвикани от вирусни и бактериални ваксини, анатоксини и имуномодулатори, както и ултраструктурна характеристика на инфекциозни микроорганизми, ваксинални щамове и продукти. Значително научно постижение е разработването на пълния диагностичен панел за идентифициране на антиген презентиращите (Лангерхансови) клетки в кожата и антиген презентиращите клетки в стомашно-чревния тракт. Основно направление в научно-изследователската дейност на лабораторията е морфологичното проучване на промените в имунната система на третирани с оралните полибактериални имуномодулатори Респивакс, Дентавакс и Уростим опитни животни.

Съвместно с БУЛБИО-НЦЗПБ-ЕООД се изследва ултраструктурата на българския производствен BCG щам. Ново научно направление е морфологичното проучване на бронхо-асоциираната лимфоидна тъкан в морски свинчета, третирани с BCG ваксина и с имуномодулатори /Респивакс, Лентинан/.

< начало

В плана на отдела по епидемиология и надзор на заразните болести за научната дейност през 2007 г. са включени 6 теми: 4 проекта с Европейския съюз и 2 теми финансирани със средства на НЦЗПБ, работата по които продължава и през 2008 г. Сътрудниците от отдела работят по други 7 международни проекта, 4 от които се изпълняват съвместно с МЗ, но с основно участие на епидемиолозите от НЦЗПБ. още по темата

< начало

Научно-изследователската дейност на НРЛ по микология към отдела по микробиология е свързана с разработването на експериментални методи за изследване особеностите на микотичните инфекции и прилагането на практика на диагностичните методи.

Научно-изследователската дейност на референтната лаборатория по стрептококи и дифтерия се финансира от Национален Съвет "Научни изследвания" при Министерство на образованието и науката чрез участие в конкурси. До сега лабораторията е получила финансиране и е завършила работа по три договори. Основни направления на научно-изследователската дейност на НРЛ по стрептококи и дифтерия са:

  • Изследване на патогенността на клинични изолати Streptococcus pyogenes чрез генетични и фенотипни методи: продукция на пирогенни токсини, ензими, инвазини, М протеин. Прилагат се полимеразно-верижна реакция (PCR) за детекция на гени, кодиращи съответните фактори на патогенност, секвениране на emm гена, кодиращ М протеина, серотипизиране и др. методи.
  • Проследяване на честотата и новото на антибиотична резистентност на клинични стрептококови изолати във времето; изследване на механизмите на макролидна резистентност чрез PCR за детекция на ermB, ermTR и mefA – гените, кодиращи различните механизми. Изследват се различните фенотипове и резистотипове.
  • Епидемиологично маркиране на стрептококови изолати чрез генетични методи като emm секвениране, електрофореза в пулсово поле (PFGE) и др.
Основни направления на научно-изследователската дейност на референтната лаборатория по стафилококи са:
  • Проучване на факторите на патогенност при S. aureus и коагулаза-негативни стафилококи с цел сравняване на щамове, изолирани при асимптомно носителство с такива от инфекции с различна локализация. Използват се методи като изследване на биофилм (слайм) продукция при S. aureus и CNS, PCR детекция на гени кодиращи фактори на вирулентност - ентеротоксини, токсик-шок синдром токсин-1, Panton-Valentine левкоцидини адхезини, като колаген- и фибронектин-свързващи протеини.

  • Типиране на метицилин-резистентни Staphylococcus aureus (MRSA), изолирани в болници в различни райони на страната с оглед установяване на клоналните връзки между щамовете. Цел на проучванията са дефиниране на превалиращите в страната епидемични вътреболнични щамове MRSA, тяхното разпространение в страната и свързването им с определен генотип на токсин-продукция и определен фенотип на антибиотична резистентност.

  • Характеризиране и типиране на придобити в обществото MRSA, сравняването им с придобитите в болниците щамове, както и проучване на факторите им на вирулентност, свързани с повишена патогенност, като Panton-Valentine левкоцидин. За типиране на стафилококови изолати лабораторията използва както фенотипни методи като фаготипиране, тако и генотипни методи като PCR-базирани техники, определяне на токсинови генотипове, макрорестрикционен анализ чрез електрофореза в пулсово поле (PFGE) и секвенционно типиране чрез секвениране на spa-гена, кодиращ протеин А (spasequencetyping). Лабораторията участва в Европейската програма Seqnet.org, представляваща мрежа от лаборатории, изпълняващи секвенционно типиране и обменящи резултати чрез интернет база данни. Програмата има за цел дефиниране на превалиращите клонове MRSA, разпространени в Европа.

  • Носното носителство на S. aureus като рисков фактор за стафилококови инфекции – изследване с фено- и генотипни методи на връзката на носното носителство със стафилококови кожни инфекции, постоперативни раневи инфекции, катетър-свързани инфекции, бактериемии и др.

< начало

През м.ноември 2005 год. беше издадена монографията "Наръчник за микробиологична диагностика на туберкулозата" с автор д-р Елизабета Бачийска, зав. НРЛ по туберкулоза и рецензент ст.н.с. д-р Тодор Кантарджиев, зав. Микробиологичен отдел, НЦЗПБ и национален консултант по микробиология. Публикуването беше реализирано с любезното съдействие на Swiss Agency forDevelopment andCooperation.

Научно-изследователската дейност на НРЛ по борелии, лептоспири и листерии е съсредоточена върху разработване на методи за по-точна и по-ранна диагностика на Лаймската борелиоза, посредством усъвършенстване на серологичната диагностика и въвеждане на молекулярно-генетични методи за доказване генома на етиологичните агенти. Проучват се причинителите на болестта у нас както антигенно, така и генетично. Изследванията се разширяват с обхващане на други, причинявани от кърлежи заболявания – човешката гранулоцитна ерлихиоза, някои рикетсиози и др. Провеждат се еколого-епидемиологични проучвания върху тяхното разпространение в България с изясняване заразеността на техните резервоари и вектори в природата. Научно-изследователската дейност се подпомага от Национален Фонд "Научни изследвания" към Министерство на Образованието и Науката чрез участие в конкурси. До сега лабораторията е получила финансиране и е завършила работа по редица договори. Научно-изследователската дейност на Националната референтна лаборатория по контрол и мониториране на антибиотичната резистентност се финансира от Фонд „Научни изследвания" при Министерство на Образованието и Науката чрез участие в конкурси. През 2005 г. лабораторията е получила финансиране по два договора.

< начало

НРЛ по чревни инфекции извършва микробиологични проучвания с цел контрол на ESBL-продуциращи щамове Salmonella и Shigella с хуманно и ветеринарно медицинско значение, както и определяне на патотиповете диарогенни E.coli със съвременни фено- и генотипни методи.

Изследователската дейност на НРЛ по молекулярна биология е в няколко направления:

  • Амплификация на специфични рестриктазни фрагменти като нов подход за генетично маркиране и идентификация на микроорганизми. Оптимизиране на AFLP метод за молекулярна идентификация и типиране на бактерии и дрожди. Натрупване на база данни от AFLP профили. На базата на специфичният рестриктазен профил на всеки микроорганизъм да се доразвие и изпита метод при който с подходяща опростена софтуерна обработка да може да се идентифицира всеки изследван вид или типират щамове. Принципа на работа се базира на видово еднакви и щамово различни рестриктазни AFLP фрагменти.

  • Идентификация на генетични маркери за антибиотична резистентност при бактерии. Изследване на маркери за резистентност за които има вече праймери и анализ за нови механизми на антибиотична резистентност при български щамове.
  • Прилагане на модифициран РНК-AFLPметод за търсене и изследване на нови гени и механизми на резистентност при бактерии и гъби. На база на различната експресия на гени отговорни за антибиотична резистентност при двойки щамове – чувствителен/резистентен да се търсят гени които са специфично експерирани при резистентни щамове.

  • Изследване на нови възможности на ДНК амплификационни техники чрез разработване на метод за множествена амплификация чрез отместване на ДНК веригата и лигазно-медиирана хибридизация с белязани сонди за доказване на особено опасни патогени причинители на туларемия, чума, бруцелоза и антракс.
  • Въвдеждане на ДНК секвениране на 16S рДНК гена и други универсални маркери (rpoB) за идентифициране на трудно доказвани видове и филогенетични отнасяния.
     
  • Въвеждане на флуоресцентен RFLP анализ за идентификация на атипични микобактериални видове.Биохимичната идентификация на повече от 60 микобактериални вида е трудоемка и неточна. Аплифицирането на маркери с родово полиморфни, но видово специфични рестриктазни места и техния компютърен анализ в значителна степен улестняват идентификацията. До сега лабораторията прилагаше RFLP анализ на rpoB гена. Допълването на анализа с още 2 или 3 други полиморфни маркера и въвеждането на ДНК секвенирането на хипервариабилните участъци от 16S рДНК гена в значителна степен ще прецизират идентификацията на микобактериите.

  • Оптимизиране на разработени или адаптирани методи за изолиране на ДНК от патологични материали и околна среда – кръв, урина, ликвор, храчка, вода, почва, биопсия, месо, храни и чисти бактериални култури. Изпитване и въвеждане на специфични положителни вътрешни контроли на аплификация за Chlamydia trachomatis, Bordetella pertussis, Francisella tularensis.
  • Подпомагане изследователската дейност на други референтни лаборатории

< начало

Традиционно в НРЛ по особено опасни бактериални инфекции се извършват проучвания в областта на етиологията, епидемоилогията и диагностиката на инфекциите с висок медицински и епидемиологичен риск (ИВМЕР) като: Взривът от туларемия в Р. България, започнал през 1997 г.

Предстоящи научно-изследователски и организационни проекти:

  • Проучване контаминацията с легионели на болнични екосистеми Проучване значението на легионелите като причинители на тежки пневмонии у нас – вътреболнични и придобити в обществото
  • Роля на некултивируемите амебни ендосимбионти като причинители на пневмонии Изграждане на ефективен лабораторно базиран надзор на легионелните инфекции
Основни направления в научно-изследователската и внедрителска дейност на НРЛ по анаероби са:
  • Определяне участието – честота и относителен дял на различните видове облигатни анаероби и тяхното съотношение с аеробните бактерии при различни видове инфекции – интраабдоминални, мекотъканни, белодробни, ЦНС и УНГ инфекции, остеомиелити и други.
  • Апробиране на схеми и методи за микробиологична диагностика на анаеробните бактерии, Campylobacterи Helicobacterpyloriл
  • Насочено търсене и изолиране на сравнително по-новия анаеробен вид Bilophilawadsworthia и анализиране на случаите, в които той участва. Изпитване in vitro чувствителността на различни видове анаеробни бактерии, Campylobacterи Helicobacterpylori, изолирани в нашата страна, към най-често използваните за лечение на тези инфекции антибиотици. Използване на получените резултати за определяне на антибиотиците за избор за лечение и изработване на антибиотична стратегия при приложението на различните видове антимикробни лекарствени средства. Изслеване честотата на продуциране на бета-лактамази в изолираните от нас щамове и определяне ефективността на комбинираното приложение с инхибитори на бета-лактамазите.
  • В научната дейност на лабораторията се работи в непосредствена колаборация с референтни анаеробни лаборатории от Франция, Англия и водещата в областта на анаеробната бактериология Wardhworth анаеробна лаборатория от Лос Анджелис – САЩ, чиито сътрудници бяха част от гост - лекторите на проведения през 1998 г. и преминал с голям успех Семинар по анаеробни инфекции.

< начало

Научната дейност на отдела по паразитология и тропическа медицина се състои в изучаването на епидемиологията, имунологията, патогенезата, клиниката, диагностиката, лечението и профилактиката на местните и внасяни тропически паразитози. Усилията са насочени главно към широко разпространените местни паразитози като трихинелоза, ехинококоза, токсоплазмоза, аскаридоза, ентеробиоза, хименолепидоза, трихомоназа и ламблиоза.

Опортюнистичните паразитози (токсоплазмоза, криптоспоридиоза, бластоцистоза, пневмоцистоза) при имунокомпрометирани пациенти се диагностицират чрез морфологични, серологични и молекулярнобиологични методи. Изучават се етиологичната структура, клиничните особености и епидемиологията на тези инфекции. Проучва се естественото разпространение на висцералната лайшманиоза. Внасяните паразитози – малария, амебиаза, филариатоза, анкилостомидоза, лайшманиоза и др. се изучават основно с цел да се ограничи техния внос и местна трансмисия и епидемично и ендемично разпространение в страната.

На дневен ред също такa са и разработването и изпълнението на програми за контрол на паразитозите. Проучват се и проблемите на екологичната паразитология. Изучават се Naegleria и Acantamoebaspp. Изследват се основни вектори като специфични биологични преносители на маларийните паразити и лайшманиите. По-важните резултати от провежданата в отдела научно-изследователска дейност за периода 2000 – 2005 година по проектите се свеждат до следното: Зоонози. Успешно са приключили 3 научни проекта – по трихинелозата и токсокарозата (от научния план на НЦЗПБ) и един международен проект по зоонозите с института по паразитология в Берн, Швейцария.

Обобщените резултати от тези проекти са както следва:

  • Осъществени са пренос и внедряване на PCR технология в диагностиката на токсоплазмозата (B1-gene-PCR), трихинелозата (multiplex и nested PCR), кактои PCRза идентификация на трихинелните видове и на свободно-живеещи амеби.

  • Проучени са общо 19 трихинелозни взрива (2000 – 2004 г.). Чрез молекулярно-биологични изследвания (nested, multiplexPCR), а в 14 от случаите и с проведена потвърдителна репродуктивна изолация са регистрирани 2 трихинелни генотипа – T.britovi и T.spiralis. На базата на проведените проучвания 10 от тези взривове са свързани с консумация на инфектирани месни продукти с T. britovi отдомашно и диво прасепри 5 случая и при 9 - с T.spiralis.

  • Проучени са 942 лица, въвлечени в консумацията на инфектирани месни продукти от посочените взривове. Анализирани са някои особености в клинико-епидемиологичните и имунологичните характеристики на заболяването у хората, свързано с двата трихинелни генотипа. Определени са и най-често засегнатите региони от трихинелозни взривове, а също така бе изготвена и карта с медико-географско картографиране на огнищата, което дава съществена информация за географското разпространение на отделните трихинелни генотипове в България.

  • Разработен е и е внедрен WB като потвърдителен серологичен тест при трихинелозата и ехинококозата.

  • Проведено е и проучване върху генотипната принадлежност на изолати, получени от междинни и крайни гостоприемници с ехинококоза, което показа че всички изследвани изолати принадлежат към G1 генотип - овчи щам на E.granulosus. При изследването на материали от 431 животни за неоспороза, получени от 27 различни места, е установена 0 - 40 % серопозитивност, което сочи,че и в България неоспорозата играе съществена роля за абортите при говедата.

  • Извършено е клинико-диагностично проучване на токсокарозата в България. Разработени са и са внедрени в лабораторни условия два метода за серологична диагностика на токсокарозата – ELISA и Western blot, като и двата метода се базират на екскреторно/секреторни антигени (ЕСА) от ларви на паразита, култивирани invitro.

  • Определена е чувствителността и специфичността на тестовете: ELISA – чувствителност 94.8%, специфичност 95.1%; Western blot - чувствителност 96%, специфичност 100%. Изследвани са общо 1184 лица, суспектни за токсокароза, като 129 (10.9%) от тях са положителни в ELISA. Според клиничната симптоматика при пациентите с висцерална токсокароза най-често се срещат еозинофилията (до 67%) и алергичната симптоматика и най-засегнати са жените над 18 год.

< начало

Опортюнистични паразитози.

С изследвания за чревни протозои са обхванати 1503 лица, като паразитологична находка е регистрирана при 4.39%от тях. Открита е Криптоспоридиоза (при 3 болни със СПИН L. intestinalisи B. hominis(3.34%). Изследвани са общо 1309 лица (имунокомпетентни и имунокомпрометирани) за токсоплазмоза за определяне на антитоксоплазмени IgG, IgM и IgA антитела. Сероположителни за токсоплазмоза са 44.23%, като сред тях преобладават тези с IgG реактивност, свидетелство за латентна инфекция. Серологични данни за свежа, вродена или реактивирана токсоплазмена инфекция е установена у 3.51% пациенти.

С цел осъвременяване на лабораторна диагностика на токсоплазмозата е внедрен в рутинната диагностика PCR метод (по Burg) за детекция на T. gondii в пре- и постмортални клинични материали. От изследваните 25 материала (ликвор, мозък, ч. дроб, б. дроб, плацента и пъпна връв) положителна находка за присъствие ДНК на T. gondiiе установена в 6.

Разработен е и е внедрен и Western blotting (по Towbin) за ранна постнатална диагностика на конгениталната токсоплазмоза. Проучени са 6 препарата токсоплазмени антигени като са установени диагностичните фракции. При успоредно изследване на двойки серумни проби от майки и суспектни за конгенитална токсоплазмоза новородени, конгенитална инфекция не се потвърди чрез Western blot.

< начало

УЧЕБНО-ПРЕПОДАВАТЕЛСКА ДЕЙНОСТ

< начало

РЕФЕРЕНТНА И ДИАГНОСТИЧНО-ЛЕЧЕБНА ДЕЙНОСТ

  • Имунологични и алергологични лаборатории

  • Вирусологични лаборатории

  • Микробиологични лаборатории

  • Паразитологични лаборатории  

< начало

ПРОТИВОЕПИДЕМИЧНА ДЕЙНОСТ

  • Надзор на заразните болести

  • Национален имунизационен и консултативен център (НИКЦ)  

< начало

ИНФОРМАЦИОННО-ИЗДАТЕЛСКА ДЕЙНОСТ

< начало

ПРОИЗВОДСТВЕНА ДЕЙНОСТ

Научно-теоретичните разработки на отдела се внедряват успешно в диагностичната практика.

На базата на собствен и чужд опит в Централната лаборатория по имунология са разработени ефикасни методи за конюгиране на моноклонални антитела с флуорохроми с различен спектър на емисия (FITC, Phycoerythrin и Phycoerythrin/Cy5), което позволи създаването на диагностични препарати за имунофенотипна характеристика левкоцитите чрез многоцветна флоуцитометрия. Сега лабораторията произвежда регенти за 16 левкоцитни маркера, които са от първостепенно значение за диагностиката на имунологичните и онкохематологични заболявания.

Важно постижение на ЦЛИ е създаването на моноклонални антитела за типизиране на кръвногруповите антигени АВО, защитени с два патента. Успоредно с това е разработена и внедрена съответна технология за ролерно и биореакторно култивиране на хибридомни клетки, последвана от въвеждането на ново поколение мембранни технологии за производство на моноклонални антитела. Произвежданите реагенти за типизиране на кръвни групи отговарят на всички местни и международни изисквания за диагностични медицински изделия, а производственият процес е сертифициран за съответствие с ISO 9001:2000.

В номенклатурата на лаборатория по Алергия са включени над 160 алергенни продукти за диагностика, като производствената дейност е акредитирана по ISO 9001:2000 EN ISO 9001:200;BS ENISO 9001:2000 Произвеждат се и широк спектър на алергени за специфична хипосенисбилизация, като стремежът на специалистите в лабораторията е да се правят индивидуализирани алергени, съобрзени с конкретната чувствителност на всеки отделен пациент. Химически модифицираните алергени от тревни полени и микрокърлежи в домашния прах са с доказана ефективност и безопасност и вече трайно намериха своето място за специфичното лечение на алергията

Ежегодно в страната ни, с помощта на алергенните препарати, произведени от лаборатория по Алергия, се диагностицират десетки хиляди алергично болни и не по-малко от 12 000 -15 000 от тях се подлагат на лечение по метода на специфичната хипосензибилизация/имунотерапия с много добри клинични резултати. Произвежданите алергенни препарати са основа за развитието на клиничната алергология в страната. Признание за качеството на нашите алергенни препарати е и фактът, че те са търсени и в чужбина и успешно се изнасят и прилагат в клиничната практика в Русия, Испания, Македония, Либия, Молдова, Ирак и др.

В НРЛ по анаероби се извършва производство на следните газ-генериращи пакети: AnaerobPack за получаване на анаеробна атмосфера за култивиране на различни облигатни анаероби; Helico - Campy Pack – за създаване на атмосфера с 10% CO2 и 5% O2,, подходяща за култивиране на микроаерофилни бактерии като CampylobacterиHelicobacterpylori.; CarbonDioxide Pack осигурява атмосфера с 6 - 8% CO2 за изолиране на микроаерофили като N.meningitidis, N.gonorrhoeae, Gardnerella и др.

Важен дял от дейността на лаборатория Химия и ДДД заема производството на хартиени индикатори за ежедневен контрол на извършваните в здравната мрежа стерилизации. Отчитат едновременно температурния режим и необходимото стерилизационно време. Предназначени за контрол на три стерилизационни режими:

  • водна пара под налягане при 121º С кат. № 449078 (270 теста); кат. № 449178 (1800 теста);

  • с водна пара под налягане при 134º С кат. № 449088 (270 теста); кат. №449188 (1800 теста);

  • със сух горещ въздух при 165º С кат. № 449098 (270 теста); кат. № 449118 (135 теста); кат. № 449198 (1800 теста)

Лаборатория Дезинфекция, стерилизация и биоиндикатори произвежда биологичен тест на базата на B. Stearotermophilus, който е предназначен за контрол на стерилизацията с водна пара под налягане при 121ºС и 134ºС. Прилага се за периодичен микробиологичен контрол на стерилизационната апаратура:

  • биологичен тест за контрол на стерилизационна апаратура кат. № 449068

< начало

ЕКСПЕРТИЗНА ДЕЙНОСТ

В секция ДДД се извършва експертно микробиологично, биологично и химично окачествяване на ДДД-препарати, оценка ефективността на режима на нови дезинфекционни и стерилизационни апарати и мониторинг на санитарно-хигиенните дейности на различни производства. В лаборатория Дезинфекция, стерилизация и биоиндикатори се извършва микробиологична експертиза на препарати за дезинфекция на ръце, инструментариум и повърхности. Лаборатория "Химия на ДДД" извършва химичен анализ на препарати за дезинфекция, дезинсекция и дератизация.

< начало

ФИНАНСОВА И АДМИНИСТРАТИВНО-СТОПАНСКА ДЕЙНОСТ

Дейност на СЛУЖБАТА ПО ТРУДОВА МЕДИЦИНА и анализ на временната нетрудоспособност

Ново направление в ЦЛИ, целящо дефинирането на параметри за характеризиране на клетъчните ефекторни механизми на естествения имунитет, както и възможностите за тяхната модулация; за пръв път ще бъдат изследвани малки регулаторни левкоцитни субпопулации, които имат отношение към активирането на естествения клетъчен имунитет и насочването на адаптивния отговор.